标题： AF 700 CTB，Alexa Fluor 700 CTB，AF 700 Cholera Toxin Subunit B，Alexa Fluor 700 Cholera Toxin Subunit B
一、化学试剂的基本信息
保存条件：避光、-20°C储存，避免反复冻融
英文名称：AF 700 CTB，Alexa Fluor 700 CTB，AF 700 Cholera Toxin Subunit B，Alexa Fluor 700 Cholera Toxin Subunit B
中文名称：AF700 标记的霍乱毒素B亚基
溶解性：可溶于水，也能溶解于部分有机溶剂，如二甲基亚砜
规格：10mg、25mg、50mg
纯度：95%+
品牌信息：陕西新研博美
展开剩余84%二、基本定义
Alexa Fluor 700 CTB（AF700 CTB）是一种将红色近红外荧光染料 Alexa Fluor 700（AF700） 与霍乱毒素B亚基（CTB）共价偶联形成的复合物。
CTB 作为神经示踪和细胞膜标记的经典工具，能够特异性结合细胞膜表面的 GM1神经节苷脂，而 AF700 提供高亮度、低背景干扰的近红外荧光信号（激发波长 696 nm，发射波长 719 nm）。
该探针兼具 靶向特异性 与 成像清晰度，广泛应用于神经科学、细胞生物学及活体深层组织成像等领域。
化学结构特点
CTB 核心结构：
五聚体蛋白：由 5 个相同亚基（分子量约 11.4 kDa）组成，总分子量约 57 kDa。每个亚基含一个 GM1 结合位点，结合亲和力高达 10¹⁰ M⁻¹。
无毒性：CTB 是霍乱毒素的非毒性部分，不会引发细胞毒性信号。
AF700 染料：
近红外荧光特性：激发波长 696 nm，发射波长 719 nm，处于生物组织光学窗口（650-900 nm），组织穿透性强，背景荧光低。
化学修饰优化：通过磺化基团提升水溶性，可直接溶于 PBS 等生物缓冲体系；光稳定性强，抗淬灭能力优于传统染料（如 Cy5.5、Cy7）。
共价偶联：采用 NHS 酯法 将 AF700 标记于 CTB 的赖氨酸残基上，形成稳定酰胺键，标记率 2-5 个染料分子/CTB 五聚体，保留 CTB 的天然构象和功能。
整体特性：
水溶性好：适配细胞培养、组织切片等多种实验体系。
pH 耐受性宽：在 pH 4.0-10.0 范围内稳定。
储存稳定性佳：-20℃ 避光冻存可长期维持活性，反复冻融 5 次内无明显活性下降。
使用风险与防范措施
潜在风险：
非特异性结合：过高浓度或长时间孵育可能导致 CTB 非特异性吸附至细胞膜其他区域，开云app下载增加背景信号。
光毒性：长时间激光激发可能损伤细胞（如活性氧生成），影响实验结果。
储存与操作风险：反复冻融或不当储存（如未避光）可能导致探针活性下降或荧光淬灭。
{jz:field.toptypename/}防范措施：
优化实验条件：
浓度控制：根据预实验确定最佳标记浓度（通常 1-10 μg/mL），避免过度标记。
孵育时间：活细胞孵育 20-30 分钟（37℃），固定细胞可延长至 1 小时。
温和固定：使用 4% 多聚甲醛固定细胞，避免甲醇等有机溶剂破坏膜结构。
减少光毒性：
使用低功率激光或缩短曝光时间，避免长时间连续照射。
添加抗氧化剂（如维生素 C）至缓冲液中，减少光诱导损伤。
严格储存管理：
短期保存：4℃ 避光可存放 1-2 个月（需分装，避免反复解冻）。
长期保存：-20℃ 避光冻存，复溶后用无叠氮钠的 PBS 稀释，工作液现配现用。
质量控制：
使用前通过 SDS-PAGE 或 HPLC 验证探针纯度（≥95%）。
通过流式细胞术或荧光显微镜确认标记效率（如 GM1 阳性细胞荧光强度显著高于阴性对照）。
三、应用优势与特点
神经科学研究：
神经示踪：CTB 被神经元摄取后通过逆向运输至胞体，AF700 的近红外荧光可穿透较厚组织（如头皮、颅骨），实现 无创全脑成像，追踪神经纤维投射与分布。
长期动态观察：AF700 光稳定性强，适合长时间活体成像（如神经发育、再生研究）。
细胞膜与脂筏研究：
脂筏标记：GM1 是脂筏的标志性成分，AF700 CTB 可标记脂筏分布，研究其在 信号转导、膜运输 等过程中的动态变化。
低光毒性：近红外荧光减少光损伤，适合活细胞长时间观察（如细胞膜流动性分析）。
活体深层组织成像：
全身 GM1 分布分析：通过尾静脉注射 AF700 CTB，可快速结合全身各组织细胞表面的 GM1，实现 肝脏、肠道、肿瘤 等深层器官的活体荧光成像。
肿瘤研究：肿瘤细胞表面 GM1 异常表达，AF700 CTB 可用于 肿瘤定位与动态监测（如生长、转移）。
多重标记与多色成像：
光谱兼容性：AF700 波段与常见荧光染料（如 FITC、TRITC、Cy5）光谱区分良好，适合 多色成像实验（如同时标记不同细胞群或细胞器）。
高信噪比：近红外信号降低背景干扰，提升检测灵敏度。
分子示踪与检测：
高灵敏度检测：在微流控系统中，AF700 CTB 可作为目标分子，与抗体修饰的磁珠联用，开发 高特异性检测方法（如 GM1 定量分析）。
四、新研博美目录列表：
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Methacrylate-PEG-Sodium Alginate
Gly-Gly-Gly-PEG2-azide，Gly-Gly-Gly-PEG2-N3
azide-PEG-hydrazide，N3-PEG-hydrazide，MW：1000
温馨提示：
试剂仅用于科研实验，不可用于人体~~~~~编辑作者：陕西新研博美木南
发布于：陕西省
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